2025年12月23日，沙砾生物新一代基因敲除型肿瘤浸润淋巴细胞（Tumor-Infiltrating Lymphocytes,TIL）产品GT307注射液获FDA IND批准。GT307是一款基于CRISPR基因编辑技术的下一代双基因敲除型TIL产品，旨在解决传统TIL在肿瘤微环境中易发生功能耗竭、持续性不足等关键瓶颈问题。该项目选择了高保真CRISPR/AaCas12bMax编辑器，标志着这一类具备“0脱靶”特性的基因编辑工具，正在从研究端走向临床端。
高保真正在成为基于基因编辑的细胞疗法“隐形门槛”
在基因与细胞治疗领域，监管对脱靶风险、编辑一致性及原材料的合规性一贯高度关注，这也是近年IND批准审核中的关键技术考量。这意味着编辑工具本身是否具备“临床可用能力”，正在直接影响项目推进。在这一背景下，近岸蛋白完成临床级“0脱靶”基因编辑器AaCas12bMax的FDA DMF备案（DMF No.041711），成为行业中少数可被IND/NDA直接关联引用的编辑工具之一。DMF文件系统性覆盖产品特性、分析方法、生产工艺及关键质量控制点，可通过授权信机制，支持中美双报客户加速注册申报。
为什么是AaCas12bMax，而不是“更熟悉的Cas9”？
1 天然“0脱靶”的高保真特性
Cas12b（C2C1）源自酸性脂环酸芽孢杆菌（Alicyclobacillus acidiphilus），其对sgRNA spacer的碱基错配容忍度极低，在人和小鼠细胞中几乎不容忍任何单个mismatch。这一特征使得Cas12b系统具有极高的编辑位点保真性，潜在脱靶编辑位点和脱靶编辑概率均远低于Cas9和Cas12a，显著提高基因编辑安全性，对标安全性要求极高的临床应用场景。
Cas12b天然具有“0脱靶”效应[1]
基于unbiased分析的潜在脱靶位点，AaCas12bMax系统具有远低于Cas9的潜在脱靶位点和染色体易位风险
2 工程化升级：AaCas12bMax=高效率+高保真
通过MIDAS蛋白工程化体系改造，AaCas12bMax在保留天然“0脱靶”特性的同时，编辑效率已提升至可媲美Cas9的水平。这也是其已被应用于近30个KO靶点临床转化研发管线的关键原因。
AaCas12bMax系统在各类体外细胞系以及原代细胞中（T细胞、干细胞等），均表现出优秀的编辑效率（＞90%）。
值得注意的是，在沙砾生物AaCas12bMax编辑后的TIL产品中，细胞扩增能力和细胞存活能力得到显著的提高，TIL扩增后产生的总细胞数增加了3-5倍。更进一步地，这些AaCas12bMax编辑后的TIL产品表现出更高的细胞干性、更低的耗竭特征和凋亡率、以及在体内回输后更强的扩增能力。这表明，相对于传统SpCas9系统基因编辑会对TIL产品造成应激损伤，AaCas12bMax编辑损伤更小、编辑后的TIL产品能够具有更好的细胞状态。RNA-seq组学研究进一步发现，AaCas12bMax编辑后T细胞产品的DNA修复速度更快，同时细胞凋亡低于SpCas9[2]。
AaCas12bMax在体外编辑应用中具有与Cas9几乎相同水平的敲除效率和远低于Cas9的脱靶效应。
3 规避Cas9专利壁垒，释放商业化空间
与Cas9复杂且昂贵的国际专利网络不同，AaCas12bMax拥有清晰、可控的底层与应用层专利体系：
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底层专利已在中、美、日等多国授权
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天泽云泰拥有基因与细胞治疗领域授权，近岸蛋白获得AaCas12bMaxGMP级和RUO级蛋白的生产和市场推广销售许可。
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避免多重专利许可叠加带来的不确定性和高成本
这使基于AaCas12bMax的基因与细胞疗法在全球化布局与长期商业化上具备明显优势。
4 不只是一个酶，而是一套“临床可用”的基因编辑解决方案
随着基因与细胞治疗的不断发展，编辑工具的选择，已不再只是效率之争，而是安全性、合规性与长期可持续性的综合判断。AaCas12bMax正在成为下一个临床级基因编辑器之一。
参考文献
[1]Teng, F., et al., Repurposing CRISPR-Cas12b for mammalian genome engineering. Cell discovery, 2018. 4(1): p. 63.
[2]沙砾生物官方公众号