细胞免疫荧光（Immunofluorescence, IF）是科研中最常用的可视化技术之一 —— 通过抗原抗体特异性结合，让目标蛋白带上 “荧光标签”，再借助激光共聚焦显微镜捕捉信号，就能清晰看到蛋白在细胞内的定位、分布甚至相互作用。而蔡司 LSM 980作为顶尖激光共聚焦系统，凭借超高分辨率和灵活的参数调节，能让实验结果更精准、图像更精美。本文就带大家从 “样本制备” 到 “图像采集” 全流程拆解，再用实战案例帮你快速上手！
细胞免疫荧光（IF）技术的核心的是抗原 - 抗体的特异性结合反应 —— 用荧光素标记的抗体作为 “探针”，精准识别细胞内目标抗原，再通过荧光信号可视化呈现抗原的定位、分布及表达水平。该技术兼具高特异性与空间分辨率，是蛋白定位研究、疾病标志物检测的核心手段，也是灵赋拓普细胞技术平台的核心支撑技术之一。
注意事项
◆ 信号弱或无：一抗失效/稀释过度；固定过度（PFA固定时间太长）；通透不足；二抗不匹配（一抗是鼠源，二抗则需要是抗鼠的）。
◆ 背景太高：封闭不充分；一抗浓度过高或非特异性结合；洗涤不彻底；二抗浓度过高；样本干燥等。
◆ 非特异性斑点：固定时产生沉淀；抗体聚集（使用前离心）；细胞状态差，有死细胞。
◆ 定位不对：固定不当导致抗原移位（膜蛋白不需要固定步骤）；错误使用甲醇固定膜蛋白。
◆ 荧光淬灭快：未使用防淬灭封片剂；曝光时间过长；封片时有气泡。
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成像前需预热仪器 30min，确保激光稳定性；
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油镜使用后及时清洁，避免污染影响后续实验；
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若出现荧光信号弱，可适当延长扫描时间或提高激光强度（需避免样本损伤）。
✅ 硬件保障：配备蔡司 LSM800激光共聚焦显微镜、标准化细胞培养室，试剂均选用进口验证产品。
✅ 技术优势：基于千余例实验数据优化的标准化流程，抗体浓度梯度验证、荧光信号质控等关键环节全程可追溯。
✅ 服务灵活：支持基础成像、定量分析、三维重构等定制化需求，从科研项目到临床前研究均可适配。
无论是蛋白定位分析、细胞表型鉴定，还是标志物共定位研究，灵赋拓普都能以专业的技术实力、严格的质控体系，为您的科研成果保驾护航。如需解锁更多实验技巧或咨询服务详情，欢迎直接在微信公众号后台留言交流～
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